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发酵罐 pH 电极的使用、校准和维护

发酵罐 pH 电极的使用、校准和维护

2023-02-01

细胞培养环境中不断变化的 pH 值几乎可以改变每个细胞过程,如新陈代谢、细胞生长。 细胞外 pH 值呈弱碱性,通常为 7.3-7.4,而细胞内 pH 值略低,为 7.2。 许多细胞器(例如线粒体)保持与细胞质 pH 值略有不同的 pH 值,但如果这些差异太大,则会对细胞器产生显着的功能影响。 由于 pH 是细胞培养最重要的参数之一,因此 pH 电极是发酵过程中 pH 控制的关键。

 

Innova 生物反应器发酵罐 采用优质进口 pH 电极,为 pH 控制提供积极支持:采用无漂移测量,测量信号在蒸汽灭菌、高压灭菌和 CIP 清洗后始终保持稳定。


开始前我们应该做什么?

1. 确认 pH 玻璃和轴没有机械损坏。

2. 生物反应器 pH 电极具有覆盖陶瓷隔膜的硅胶保护密封圈; 密封盖必须用随附的刀片移除。

3. 取下水壶盖,用蒸馏水冲洗,确保没有电解质结晶。 电极只能在冲洗后用纸巾擦干。 不要摩擦它,因为这可能会产生静电并延长响应时间。

4. 确认 pH 玻璃后面没有气泡,并在垂直平面上轻轻摆动电极以除去气泡。

4、安装电极请参照使用说明书。

5、电极使用前可用酸性缓冲液(pH4.00)浸泡数分钟,然后用纯净水清洗玻璃泡,用吸水纸轻轻吸干玻璃泡的水分,再浸泡在中性缓冲液中( pH6.86 或 7.00 等) 几分钟以激活电极。 然后开始 pH 电极校准。


如何校准生物反应器发酵罐中的 pH 电极?

1. 拧下电极帽,连接控制器 pH 电极线。 缓慢旋转,取下保护液套,放置好,防止保护液溢出。

2、用纯水冲洗pH电极表面,用吸水纸吸干残留水分,浸入7.00的标准溶液中(浸入玻璃泡中)。 当控制器上的 pH 值稳定时,单击屏幕上的“校准”。

3、再次用纯水冲洗pH电极表面,用吸水纸吸干残留水份。 然后,将 pH 电极浸泡在 4.00 的标准溶液中。 当控制器上的 pH 值稳定后,单击屏幕上的“校准”。

4、设备自动计算零点和斜率,零点在0.0左右,正漂在0.5范围内。 当斜率为 1 且漂移为 ±0.2 时。 校准 pH 电极时,断开 pH 电极与控制器之间的连接线。 小心地将已校准的 pH 电极放在一边,以防止其掉落和砸碎。 发酵罐清洁后,将pH电极安装在发酵罐上的pH电极端口。 如果斜率不在正常范围内,需要检测是否是设备问题、电极、线路老化、校准等原因。

pH 电极校准注意事项:

1. 标定应使用新鲜的缓冲液。 如果缓冲液过期,请勿使用。

2、在后续操作前将电极放入缓冲液中1分钟。

3、冲洗电极后,用柔软的纸巾擦干水分,不要摩擦pH敏感膜。

4、电极校准周期根据不同的使用环境和精度要求确定,在保证精度的前提下确定合适的校准周期。

 

如何进行生物反应器pH电极的日常维护

1. 对于一般污染:用水、0.1mol/L NaOH 或0.1mol/L HCl 清洗电极数分钟。

2. 对于油脂或有机物污染:用丙酮或乙醇清洁电极几秒钟。

3、硫化物污染(隔膜发黑):用隔膜清洗液(硫脲/HCl)处理,将玻壳部分浸泡在溶液中(隔膜应浸没在溶液中)至隔膜无色(至少1小时) ),然后用3mol/L KCI浸泡至少12小时,充分漂洗并重新校准备用。

4. 对于蛋白质污染(隔膜发黄):用电极清洗液(胃泌素/HCl)处理,将玻璃球部分放入溶液中,确保隔膜浸没在溶液中(至少 1 小时),然后重新校准 用蒸馏水冲洗后。

5、电极再生:用电极再生液处理。 但请注意,再生只能有限地延长电极寿命。

如何存放 pH 电极?

1、电极长期不用时,应保存在3mol/L KCI或9816/ViscolytTM电解液中。

2、电极不能长期干燥存放,电极不能在表面附着有干燥介质的情况下存放。 如果电极被错误地干燥存放了几天,使用前应将其浸泡在正常的储存电解液中数小时。

3、电极不能存放在蒸馏水中。

 

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